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离心机在血型选取上的应用
更新时间:2017-07-20   点击次数:1770次

输血时如血型不合会造成患者出现输血的不良反应,因此使用相符的血型是输血安全的前提保证。而作为人类的重要遗传标志-血型,在近年科学的发展下,人们逐步探索分析,已发现300余种现人类红细胞血型抗原。当今,世界多国正努力建立稀有血型细胞血库,当中对所发现的稀有血型,如Rh、MNSs、P、Kell、Kidd、Lutheran等,建立起稀有血型系统,以保证为稀有血型的患者更加快速及时地提供合适红细胞。

 

中国稀有血型筛选与建库

在我们的临床研究中,对于稀有血型的筛选工作和具体项目中,对于引发临床不良输血反应的稀有血型抗原或是表型组合是zui值得关注的,而事实证明这些稀有抗原或是表型组合往往存在于如Vel、Lan、Jk(a-b-)、Lu(a-b-)、Rhnull、OH等这些高频率血型抗原组以及多个血型系统中,与此同时我们也对如Fy(a-b+)、Di(a+b-)等能引起输血反应和新生儿溶血病的血型抗原的中国人*的免疫反应而进行的筛选,并希望建立起符合我国国情的稀有血型库。以此来解决我国临床上的稀有血型不足、不良输血反应的发生等问题来提高我国的输血疗效。
 

尿素溶血试验

Jk(a-b-)表型的筛选:因稀有血型本身所具有特殊性,充分利用其特点设计出将其筛选出的方法,Kidd血型系统中Jk(a-b-),此种红细胞可在2M的尿素溶液中使其红细胞膜在6h以上的时间内保持完整性。而Jka和Jkb抗原的红细胞在2M尿素溶液中*溶血的时间不超过30s。其操作过程为:选取RSP加样器设备将标本红细胞稀释到1%的悬液中,并在96孔微量板上加20ul悬液,再将100ul2mol/L尿素溶液加入其中,放置离心机中以800r/min转速离心3min,溶血为阳性,不溶血为阴性,如为阴性者则进一步对血细胞做分子生物学分析。本次通过Jk(a-b-)尿素筛选实验,获得8名Jk(a-b-)表型献血者。

试管法

将选取标本红细胞稀释为2-5%悬液,标记试管(抗-Mur、-Lub、-Rhmull、-Kell、-MN、-H)并加入相应抗血清和标本红细胞各50ul。采用直接离心法或间接抗球蛋白法,轻摇观察结果;发生凝集为阳性,反之为阴性,共发现稀·临床研究·有血型7例。

在我们对稀有血型筛选过程中,有4种稀有血型是采用筛选稀有等位基因的方法。通过采用PCR的定点诱变技术,我们成功构建出含有突变SNP位点的s和Oka血型等位基因的标准质粒,制备出稀有血型等位基因突变点片段,应用在对照分子生物学方法筛选稀有血型。组建多个多重PCR体系,检测等位基因。

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