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采用密度梯度离心法分离脐血干细胞
更新时间:2017-08-10   点击次数:1744次

    利用 3 种质量浓度的聚蔗糖泛影葡胺分离液分离脐血单个核细胞,用细胞计数法、活细胞染色法及流式细胞计数仪分析单个核细胞的表面标志,以探讨密度梯度离心法分离人脐血干细胞分离介质的*浓度,建立临床级干细胞分离应用方案,使用的离心机设备为冷冻离心机

    脐血由于其来源容易,所含细胞种类和数量比较多,比骨髓和外周血中的细胞更为原始,且其临床应用不涉及社会、伦理、法律方面的限制等优势。脐血间充质干细胞可以分化为成骨、软骨、脂肪细胞等,内皮干/祖细胞治疗缺血性疾病,已经在临床有突出的疗效。

国内、外分离脐血干细胞方法常采用磁珠/流式细胞分选法、脐血库仪器/羟乙基淀粉沉淀法和密度梯度离心法。由于目的不同,各类方法有其自身特点

    脐血库分离干细胞常用羟乙基淀粉沉淀和仪器离心分离法,分离的细胞量大、成分较多但混有大量红细胞,适合用作大量分离、储存干细胞。密度梯度离心法多采用Percoll、Ficoll分离液分离细胞,得到单个核细胞群,该细胞群成分复杂,纯度不高。但密度梯度离心法分离脐血单个核细胞由于细胞得率高、方法简单等突出优点,有望成为制备临床级干细胞的优选方法,分离介质以聚蔗糖泛影葡胺zui为常用。

    应用脐血离心分离干细胞的目的是获得以干细胞(间充质干细胞、造血干细胞)为主要群体的单个核细胞群。用聚蔗糖泛影葡胺为分离介质研究何种密度状态下获得的干细胞zui多,目前尚未深入研究。文章在前期工作基础上,探索密度梯度离心法用3种不同质量浓度分离液分离脐血单个核细胞,比较分离单个核细胞不同亚群的比例和纯度,试图找出用密度梯度离心法获得干细胞比例和纯度较高的分离介质。

 

 

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