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流感疫苗生产的纯化过程和设备
发布时间:2011-07-11   点击次数:1965次
流感疫苗生产的纯化过程:
1.       已培养好的带病毒的鸡胚用75%酒精消毒;
2.       收集鸡胚尿囊液:根据鸡蛋大小收集量略有不同(每只6-10ml);
3.       尿囊液初滤JST型10μm滤芯过滤;
4.       连续流离心机或超滤系统过滤
a.  连续流离心机:用12,000rpm,流量:每分钟600-800ml,除去杂质,上清液用于透析浓缩;
b.  Millipore超滤系统,0.45μm滤膜,除去杂质
5.       尿囊液的透析浓缩:用Millipore超滤器,1000KD膜包浓缩,浓缩后通常为尿囊液量的1/30;
6.       超速离心的病毒纯化(略);
7.       福尔马林脱毒;
8.       乙醚裂解;
9.       100KD透析脱糖;
10.   去福尔马林;
11.   去乙醚……
12.   几种流行病毒抗原的混合(如H1N1+H3N2+H2N2)和稀释
13.   加入稳定剂
14.   成品
 
离心纯化需要准备的仪器和基本材料:
1.       仪器
a.  阿贝折射仪 Abbe  refractometer (测蔗糖浓度)
b.  Cole parmer 软管泵:KH-77913-25
c.  紫外分光光度计或核酸蛋白分析仪(有280nm,260nm波长的),可以是带流动池及记  录仪,也可以是带标准样品池的)
2.       梯度液
a.        PB缓冲液PH7.3
b.       30% w/w蔗糖液(Sucrose,Sigma,AR级)
c.        55% w/w蔗糖液
d.       58% w/w蔗糖液
3.       实验器具
a.        50ml有刻度玻璃管    100支
b.       500ml有刻度烧杯     5支
c.        100ml有刻度烧杯     5支
d.       1000ml有刻度量筒    3只

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